摘要
目的探讨miR-21在调节NF-κB信号通路的基础上对瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法选择2019年4-12月浙江省绍兴第二医院收治的增生性瘢痕患者,取其正常皮肤成纤维细胞GM0639以及增生性瘢痕成纤维细胞(HSF),将HSF分为空白对照组(无转染)、阴性对照组(转染非特异性siRNA)、miR-21 mimic(转染有miR-21质粒的HSF细胞组)以及miR-21 inhibitor(转染有miR-21抑制剂的HSF细胞组),培养后转染,对miR-21表达(RT-PCR法)、NF-κB信号通路的相关蛋白(WB法)进行检测,采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 RT-PCR检测后得出,HSF中miR-21的表达较正常成纤维细胞高,差异有统计学意义(P<0.05);WB结果显示,阴性对照组中NF-κB p65、IKK、Bax、Caspase-3的表达与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),miR-21 inhibitor组中NF-κB p65、IKK的表达有所降低,Bax、Caspase-3的表达有所上升,差异有统计学意义(P<0.05);miR-21 mimic组中NF-κB p65、IKK的表达较高,Bax、Caspase-3的表达较低,差异有统计学意义(P<0.05)。阴性对照组的增殖能力与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而miR-21 mimic组有所上升,miR-21 inhibitor组则下降,差异有统计学意义(P<0.05)。阴性对照组的凋亡能力与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),miR-21 mimic组的凋亡能力与对照组相比较低,miR-21 inhibitor组则较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。经相关性分析,miR-21与NF-κB p65、IKK呈正相关(r=0.691、r=0.604,P<0.05),与Bax、Caspase-3呈负相关(r=-0.597、r=-0.625,P<0.05)。结论miR-21能够提高瘢痕成纤维细胞的增殖能力,降低其凋亡能力,可能是通过提高NF-κB信号通路中NF-κB p65、IKK的表达,降低NF-κB信号通路中Bax、Caspase-3的表达完成。
-
单位绍兴第二医院