C型口蹄疫结构蛋白VP3的原核表达及生物活性

作者：刘文倩; 王猛; 张奕强; 刘永生; 张杰

来源：江苏农业科学, 2011, (04): 38-40.

DOI：10.15889/j.issn.1002-1302.2011.04.005

• C型口蹄疫
• 结构蛋白VP3
• 原核表达
• 生物活性

利用PCR扩增技术,以本实验室构建的C型口蹄疫pMD-P1重组质粒为模板扩增C型口蹄疫VP3片段,并连接到原核表达载体pGEX-6P-1上,构建阳性质粒pGEX-VP3并转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。使用不同IPTG浓度进行诱导,收集菌液进行SDS-PAGE。使用Model 422 Electro-Eluter切胶回收目的蛋白,并进行Western-Blotting分析。结果得到50 ku左右目的条带,证实融合蛋白VP3大肠杆菌中得到以包涵体形式表达,且使用切胶回收后的蛋白能被C型口蹄疫阳性血清识别,具有良好的反应原性。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 四川农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部