RNA干扰抑制土拨鼠肝炎病毒X基因表达

作者：孟忠吉; 吴珺; 张永红; 汤守兵; 李东; 柯昌征; 陈悦

来源：湖北医药学院学报, 2011, (05): 475-479.

• 土拨鼠肝炎病毒
• 土拨鼠肝炎病毒X蛋白
• RNA干扰
• 小干扰RNA Woodchuck hepatitis virus
• Woodchuck Hepatitis virus X antigen
• RNA interference
• Short interference RNA

目的:研究土拨鼠肝炎病毒(WHV)序列特异性siRNA对WHV X基因表达的抑制作用。方法:以WHV全长质粒为模板PCR扩增WHV X基因,克隆到pXF3H载体构建WHX-HA融合蛋白真核表达质粒(pXF3H-WHx);合成siRNA的模板序列,克隆到siRNA表达质粒psiRNA构建shRNA表达质粒(psiWx1、psiWx2);质粒pXF3H-WHx与psiWx1、psiWx2共转染Hela细胞,Western blot检测WHV X蛋白的表达。结果:Hela细胞中WHVX蛋白的表达受siRNA的抑制,psiWx1表达的siRNA抑制90%以上的X蛋白表达,并呈剂量依赖性,但是WHV X...

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 湖北医药学院附属太和医院