干扰Wnt5a对BCG诱导的TC-1细胞炎性反应的调控作用研究

作者：原筱潭; 马亚博; 苗申奥; 陈琪; 聂雪伊; 徐金瑞; 杨易^*

来源：中国病原生物学杂志, 2023, 18(03): 265-270.

DOI：10.13350/j.cjpb.230304

• Toll样信号通路
• Wnt5a
• BCG
• 炎性反应

目的 探究干扰Wnt5a对卡介苗(BCG)感染的小鼠肺上皮细胞(TC-1)炎性反应的调控作用，并阐明其作用机制。方法 慢病毒干扰Wnt5a处理TC-1细胞系及其阴性对照细胞系后BCG感染24h。设置4个实验组：NC组、NC+BCG组、Si-3组和Si-3+BCG组。通过Western blot检测Toll样信号通路TLR2、TLR4、Myd88、p-NF-κB和NF-κB炎症相关蛋白表达水平，免疫荧光法检测各实验组p-NF-κB表达情况，qRT-PCR检测Toll样信号通路TLR2、TLR4、Myd88、p-NF-κB和NF-κB等基因mRNA表达水平，ELISA检测细胞培养上清促炎因子TNF-α、IL-6和IL-10含量。结果 与对照组比较，BCG组炎性相关因子TLR2、TLR4、Myd88、NF-κB、p-NF-κB的蛋白表达水平(均P<0.01)和mRNA表达水平均显著上调(均P<0.05),p-NF-κB蛋白荧光强度较对照组显著增加，促炎因子TNF-α和IL-6表达水平升高(均P<0.01),抑炎因子IL-10表达水平降低。与BCG组相比，Si-3+BCG组上述蛋白表达水平(均P<0.05)和mRNA表达水平均(均P<0.01)显著下调，p-NF-κB蛋白荧光强度较BCG组均显著下调，促炎因子TNF-α和IL-6(均P<0.05)表达水平显著降低，抑炎因子IL-10表达水平显著升高(P<0.01)。结论 干扰Wnt5a可调控卡介苗(BCG)感染的小鼠肺上皮细胞(TC-1)的炎性反应，其调控作用机制是通过Toll样信号通路依赖Myd88途径抑制BCG诱导的TC-1炎性反应。

• 单位
  宁夏大学; 生命科学学院