脂磷壁酸合成相关基因dltD对高致龋力变异链球菌株耐酸能力的影响

作者:杜景云; 吴敏婧; 李艺君; 黄珊; 江山; 陈帅; 黄晓晶
来源:四川大学学报(医学版), 2022, 53(02): 235-241.

摘要

目的 通过构建变异链球菌593(Streptococcus mutans 593, SM593)dltD基因缺失株,探究dltD在SM593耐酸能力中的作用和可能机制,为龋病的生态防治提供理论依据。方法 (1)同源重组构建SM593 dltD基因缺失株SM593-ΔdltD;(2)采用全自动生长曲线分析仪绘制在不同pH培养条件下SM593和SM593-ΔdltD的生长曲线,比较二者耐酸能力;通过SM593和SM593-ΔdltD不同时间点的菌落计数(colony forming unit, CFU)计算其生存率并比较二者耐酸反应(acid tolerance response, ATR)能力;(3)通过不同pH条件下的糖酵解能力检测、质子通透性检测、质子移位膜腺苷三磷酸酶(H+-ATPase)活性检测初步探究dltD基因缺失影响耐酸的可能机制。结果 (1)PCR及测序结果显示SM593 dltD基因缺失株构建成功;(2)随着培养基pH逐渐降低,SM593-ΔdltD生长减缓,当培养基pH=5.0时无法生长,与SM593相比耐酸能力下降;SM593-ΔdltD与SM593相比ATR能力下降;(3)不同pH条件下,SM593-ΔdltD与SM593相比,糖酵解能力无明显差异,质子通透性增加(P+-ATPase活性下降(P+-ATPase活性显著降低,从而使菌株维持胞内pH稳态能力下降所致。