姜黄素下调miR-21-5p减轻缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞凋亡

作者：谢瑾; 李红; 罗浩

来源：广州中医药大学学报, 2020, 37(07): 1339-1346.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2020.07.025

• 姜黄素
• 心肌缺血再灌注损伤
• 缺氧/复氧
• miR-21-5p
• 细胞凋亡

【目的】探讨姜黄素通过调控miR-21-5p对缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响。【方法】观察姜黄素对缺血/复氧心肌细胞的影响:四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH活性;Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达水平;逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-21-5p、Bcl-2 mRNA水平。荧光素酶报告实验检测miR-21-5p与Bcl-2靶向关系。采用RT-PCR法和Hoechst 33258染色法观察姜黄素对miR-21-5p mimic转染心肌细胞miR-21-5p、Bcl-2 mRNA水平及凋亡的影响。采用Western Blot法和Hoechst 33258染色法观察姜黄素对si-Bcl-2转染心肌细胞Bcl-2蛋白表达及凋亡的影响。【结果】与空白对照组比较,缺血/复氧组细胞活力显著降低,LDH活性,细胞凋亡率,caspase-3、Bax蛋白表达水平,miR-21-5p mRNA表达水平显著升高,Bcl-2蛋白和m RNA表达水平显著降低(均P<0.01)。与缺血/复氧组比较,姜黄素5、10μmol/L组细胞活力显著升高,LDH活性,细胞凋亡率,caspase-3及Bax蛋白表达水平,miR-21-5p m RNA表达水平显著降低,Bcl-2蛋白和mRNA表达水平显著升高(均P<0.01)。荧光素酶报告实验表明miR-21-5p和Bcl-2存在直接靶向作用关系。姜黄素10μmol/L可抑制缺血/复氧条件下miR-21-5p mimic和si-Bcl-2转染的H9C2细胞凋亡。【结论】姜黄素可通过下调miR-21-5p减轻缺氧/复氧诱导的H9C2心肌细胞凋亡。

• 单位
  四川大学华西医院; 重庆医科大学