H2S拮抗HUVEC衰老与促进SIRT1巯基化和减少FOXO1乙酰化有关

作者：苑聪; 罗新园; 熊淑珊; 谢楠; 任重; 吴洁; 姜志胜^*

来源：中国动脉硬化杂志, 2023, 31(09): 746-753.

DOI：10.20039/j.cnki.1007-3949.2023.09.002

• 硫化氢
• 沉默信息调节因子1
• S-巯基化
• 叉头转录因子O1
• 内皮细胞衰老

[目的]探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头转录因子O1(FOXO1)在H2S拮抗H2O2诱导内皮细胞衰老过程中的作用。[方法]建立内皮细胞衰老模型，通过衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色在光学显微镜下观察到的蓝染细胞数(即衰老细胞)计算阳性细胞率。采用Western blot检测细胞P21、P53、纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)、叉头转录因子O1(FOXO1)、乙酰化FOXO1(ac-FOXO1)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)及过氧化氢酶的蛋白表达水平，采用生物素转换法测定S-巯基化SIRT1的表达，采用活性氧(ROS)检测定量评估细胞内ROS水平。[结果]经100μmol/L H2O2处理可显著提高SA-β-gal染色阳性细胞率和P21、P53、PAI-1的蛋白表达，提示衰老细胞模型成功建立，而100μmol/L NaHS可明显拮抗这一作用，SA-β-gal染色阳性细胞数明显下降(P<0.01),P21、P53、PAI-1的蛋白表达显著降低(P<0.01)。与对照组相比，H2O2组SIRT1、FOXO1、ac-FOXO1、MnSOD及过氧化氢酶的蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),ac-FOXO1/FOXO1比值显著增加(P<0.01),ROS水平明显升高(P<0.01)。与H2O2组相比，NaHS+H2O2组SIRT1、S-巯基化SIRT1、FOXO1、ac-FOXO1、MnSOD及过氧化氢酶的蛋白表达显著升高((P<0.05或P<0.01),ac-FOXO1/FOXO1比值显著下降(P<0.01),ROS水平明显降低(P<0.05)。[结论] H2S可拮抗H2O2诱导的HUVEC衰老，其机制与促进SIRT1巯基化和减少FOXO1乙酰化有关。

• 单位
  长沙市第一医院; 南华大学; 南华大学附属第一医院