双基因重组载体转染乙醇诱导的兔干细胞对其成脂与成骨基因表达的影响

作者：吕本浩; 李劲峰; 马源; 李成; 尚国伟; 李月白; 王义生

来源：中华实验外科杂志, 2017, 34(12): 2187-2190.

• 双基因重组载体
• 转染
• 乙醇
• 干细胞
• 成脂基因
• 成骨基因
• 基因表达

目的观察双基因重组载体转染乙醇诱导的兔干细胞对其成脂与成骨基因表达的影响。方法取第3代兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),随机分为6组:(1)正常组:正常BMSCs,无特殊处理。以下5组均给予终质量浓度0.09mol/L乙醇。(2)模型组:无基因转染BMSCs;(3)无关序列组:10μl无关序列载体转染BMSCs;(4)干扰过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达组(siPPARγ组):10μl siPPARγ基因载体转染BMSCs;(5)exCGRP组:10μl降钙素基因相关肽(CGRP)基因载体转染BMSCs;(6)双基因组:10μl双基因重组载体转染BMSCs。实验第7、14天检测各组细胞中PPARγ、CGRP、Runt相关基因2(Runx2)、骨钙素mRNA与其蛋白表达。结果实验第7天,双基因组、siPPARγ组、正常组中PPARγmRNA与蛋白均呈低表达(0.329±0.037与0.162±0.013、0.413±0.045与0.174±0.023、0.376±0.042与0.169±0.021),明显低于模型组(0.672±0.079与0.871±0.096)、无关序列组(0.674±0.083与0.823±0.089)、exCGRP组(0.683±0.079与0.839±0.091),差异均有统计学意义(均P=0.000)。双基因组、exCGRP组中均明显表达CGRPmRNA与蛋白,显著高于模型组、无关序列组、siPPARγ组、正常组,差异均有统计学意义(均P=0.000)。双基因组、exCGRP组、siPPARγ组、正常组中Runx2 mRNA、骨钙素mRNA与蛋白均呈高表达,双基因组显著高于模型组、无关序列组,且明显高于exCGRP组、siPPARγ组、正常组,差异均有统计学意义(均P=0.000)。实验第14天,各组表达量与第7天一致。结论双基因重组载体转染乙醇诱导的兔干细胞,能够同时高效阻止细胞中成脂基因表达并上调成骨基因表达,显著优于单一基因的作用。

• 单位
  郑州大学第一附属医院; 河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室; 基础医学院; 郑州大学