微小RNA-129-3p靶向E2F转录因子5对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

作者：和华; 刘少朋^*; 刘海潮; 白明辉

来源：中华肝胆外科杂志, 2021, 27(12).

• 癌, 肝细胞
• 微RNAs
• 转录因子
• 细胞增殖
• 侵袭

目的探讨微小RNA-129-3p(miR-129-3p)通过靶向E2F转录因子5(E2F5)影响肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的恶性生物学行为。方法荧光定量聚合酶链反应检测不同肝癌细胞株与正常肝细胞株中miR-129-3p及E2F5的表达;构建过表达miR-129-3p的HepG2细胞株, 噻唑蓝细胞增殖实验、平板克隆实验检测细胞增殖及克隆形成能力;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力, 蛋白质印迹法检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因法和蛋白质印迹法验证miR-129-3p和E2F5的靶向关系。实验分组如下:细胞未经转染(NC)组;转染对照miR-con(miR-con)组;转染miR-129-3p(miR-129-3p)组;共转染miR-129-3p和空载体pcDNA (miR-129-3p+pcDNA)组;共转染miR-129-3p和pcDNA-E2F5(miR-129-3p+pcDNA-E2F5)组。结果肝癌细胞株MHCC-97H、HepG2、LM3、Hep3B、PLC、Huh7中miR-129-3p的表达量均低于正常肝细胞株HL-7702, 差异具有统计学意义(均P<0.05)。与NC组和miR-con组相比, miR-129-3p组的细胞克隆数[(86.56±20.84)比(511.29±45.03)和(509.78±40.81)]、细胞迁移率[(3.03±1.29)%比(15.01±2.30)%和(14.99±2.31)%]、迁移相关蛋白MMP-2相对表达量[(0.51±0.22)比(1.87±0.30)和(1.84±0.35)]和穿膜细胞数[(33.10±1.58)比(101.23±0.31)和(100.96±3.44)个]均降低, 差异有统计学意义(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验表明miR-129-3p可负性靶向调控抑制E2F5表达。结论 miR-129-3p在肝癌细胞中低表达, 过表达miR-129-3p可通过靶向E2F5抑制肝癌细胞恶性生物学行为。

• 单位
  郑州大学