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摘要
目的构建刺毛虫毒刺的cDNA文库,克隆其毒素编码的基因。方法提取刺毛虫毒刺中的总RNA;使用clontech公司的cDNA文库构建试剂盒进行反转录,长距离PCR方法合成第二条链,酶切纯化后与载体连接,电转化入感受态细胞XL1-Blue,通过抗性筛选后进行菌落PCR鉴定,挑选插入子在300bp以上的单克隆送至测序公司测序。结果成功构建了刺毛虫毒刺cDNA文库,初步鉴定其插入子长度为250～1 000bp。结论刺毛虫毒刺cDNA文库构建成功,并获得大量的编码刺毛虫毒素的全长基因,为研究其致病机制奠定了基础。
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单位中南大学湘雅医学院; 中南大学
