断藤益母汤调控NF-κB通路减轻LPS诱导的软骨细胞炎症

作者:韩隆胤; 王强; 刘明岭; 钱凯; 曾丽盈; 杜彦仪; 黄文广; 王辰; 李楠; 林昌松*
来源:中华中医药学刊, 2021, 39(06): 22-262.
DOI:10.13193/j.issn.1673-7717.2021.06.005

摘要

目的研究断藤益母汤对LPS诱导的软骨细胞炎症的影响及其分子机制。方法收集类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)患者的膝关节软骨进行体外细胞培养和鉴定;使用CCK8法检测LPS和断藤益母汤对软骨细胞活力的影响;使用实时荧光定量PCR及ELISA检测软骨细胞中白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达;使用免疫印迹法检测NF-κB信号通路中IKK、IκBα、NF-κB蛋白表达及其磷酸化的水平;使用免疫荧光法检测NF-κB p65的入核情况。结果 (10μg/mL)的LPS及断藤益母汤在100、200、400μg/mL的浓度下对RA软骨细胞的活力没有明显的影响(P>0.05);PCR及ELISA检测显示断藤益母汤降低了LPS诱导的软骨细胞中IL-6、IL-8、MMP9、MMP13的表达(P<0.05或P<0.01);免疫印迹分析结果显示LPS增加了软骨细胞中IKK、IκBα及NF-κB蛋白的磷酸化(P<0.01),断藤益母汤抑制了LPS诱导的软骨细胞中IKK、IκBα及NF-κB蛋白的磷酸化(P<0.05或P<0.01);细胞免疫荧光显示断藤益母汤抑制了LPS导致的NF-κB p65入核。结论断藤益母汤通过调控NF-κB通路减少了LPS诱导的软骨细胞炎症。

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