大鼠IP-10-PE38 KDEL重组免疫毒素真核表达载体的构建及表达

作者：孙岚; 祁志荣; 张琴; 林媛; 李明远; **; 蒋忠华; 李虹

来源：免疫学杂志, 2007, (05): 482-485.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20070132

• rIP-10
• PE38KDEL
• 重组免疫毒素
• NIH3T3细胞
• 真核表达 rIP-10
• PE38KDEL
• Recombinant immunotoxin
• NIH 3T3 cell
• Eukaryotic expression

目的构建大鼠干扰素诱导蛋白10(rIP-10)基因和铜绿假单胞菌外毒素衍生物(PE38KDEL)基因的真核融合表达载体,并研究其在NIH3T3细胞中的表达情况。方法通过PCR获得本实验需要的rIP-10基因片段,通过酶切原核表达载体PRKL459K-IL-4-PE38KDEL获得铜绿假单胞菌外毒素衍生物PE38KDEL基因,再通过适当的酶切及连接反应,构建rIP-10与PE38KDEL融合基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-rIP-10-PE38KDEL。重组质粒经限制性性内切酶,PCR及DNA序列测定证实构建成功后,用PolyFect脂质体转染NIH3T3细胞,然后用免疫荧光技术检测r...

• 单位
  四川大学华西医院; 生物治疗国家重点实验室; 四川大学