摘要
目的:观察体外高糖诱导环境,对人视网膜色素上皮细胞中内脏脂肪素(Visfatin)的表达影响,以及研究高糖环境下重楼皂苷I(Polyphyllin Ⅰ)对Visfatin表达情况的影响。方法:人视网膜色素上皮细胞培养后分3组,正常对照组、高糖组和高糖加Polyphyllin Ⅰ药物干预组,干预培养12h后进行检测。正常对照组:5.5mmol/L葡萄糖浓度常规培养;高糖组:将25mmol/L的高糖加入培养基建立模型;高糖加Polyphyllin Ⅰ药物干预组:高糖25mmol/L和3μg/L Polyphyllin Ⅰ药物加入培养基。免疫荧光染色法观察人视网膜色素上皮细胞中Visfatin和血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达;实时荧光定量PCR检测上皮细胞中Visfatin和VEGF mRNA的表达; Western-blot法检测上皮细胞中Visfatin和VEGF蛋白的表达。结果:免疫荧光检测发现Visfatin和VEGF在正常组视网膜色素上皮细胞中表达呈弱阳性。但在高糖组视网膜色素上皮中可见Visfatin和VEGF呈强阳性表达。药物干预组中Visfatin和VEGF荧光较高糖组明显减弱。RT-PCR显示高糖组Visfatin mRNA表达水平较正常组和干预组明显增高(t=4.24、3.89,均P<0.05)。高糖组VEGF mRNA表达水平较正常组和干预组明显增高(t=3.53、2.57,均P<0.05)。Western-blot结果示Visfatin蛋白水平,高葡萄糖组表达量显著高于正常对照组(t=3.62,P=0.01),干预组表达低于高糖组(t=3.79,P<0.01)。结论:高糖环境可刺激视网膜色素上皮细胞中Visfatin的表达增加,Polyphyllin I可抑制高糖环境下视网膜色素上皮细胞中Visfatin的表达,可能为治疗糖尿病视网膜病变提供新的思路。
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单位内蒙古自治区人民医院; 内蒙古自治区中医医院; 内蒙古科技大学包头医学院