Mg~(2+)和Na~+对多核酶系统体外切割反应的影响(英文)

作者：田生礼; 郑硕; 刘士德; 徐东平; Takao OHNUMA

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2008, (07): 612-618.

• 多核酶系统
• Mg2+
• Na+
• RNA切割
• 切割反应 multiribozyme system
• divalent Mg~(2+)
• monovalent Na~+
• RNA cleavage
• cleavage reaction

为了进一步了解2价Mg2+和1价Na+存在与否的情况下,多核酶系统对底物RNA的切割效率,构建了pGEM-Coat′A,pGEM-Coat′A196Rz质粒和pGEM-MDR1靶质粒.通过用SP6/T7转录试剂盒在体外转录RNA,在无细胞系统进行切割反应,反应产物通过6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,干胶、X光片曝光自显影,利用ImageJ生物图像分析软件分析.结果表明,多核酶系统的切割效率依赖于二价Mg2+的浓度,切割产物随Mg2+浓度的增加而增加,而且具有反应时间的依赖性.在Na+浓度低于200mmol/L且单独存在时,没有切割产物生成.相反,在Na+和Mg2+共存时,表现出Na+抑制Mg2+诱导的切割活性,切割效率明显低于Mg2+单独存在时的结果.这些结果提示,在生理环境下,Mg2+对于多核酶系统对底物的切割反应是必需的,而Na+则不是.

• 单位
  解放军第302医院; 深圳大学