siRNA沉默多药耐药相关蛋白3基因对肝癌细胞耐药性的影响

作者：苏正; 刘波; 刘建平; 张华耀; 吕泽坚; 程子亮

来源：中华肝脏外科手术学电子杂志, 2014, 3(03): 174-177.

• 肝肿瘤,实验性
• RNA干扰
• 多药耐药相关蛋白质类

目的研究小干扰核糖核酸(siRNA)沉默多药耐药相关蛋白(MRP)3基因(MRP3-siRNA)对原发性肝癌(肝癌)细胞耐药性的影响。方法应用不同梯度浓度的多柔比星(ADM)制备肝癌耐药细胞株HepG2/ADM,用携带MRP3-siRNA的lipofectamine 2000脂质体转染HepG2/ADM细胞。分为HepG2细胞组(对照组)、HepG2/ADM细胞组(耐药组)和转染MRP3-siRNA的HepG2/ADM细胞组(干扰组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测3组细胞MRP3基因信使核糖核酸(mRNA)含量,用蛋白质印迹法检测MRP3蛋白表达,噻唑蓝法检测肝癌细胞对ADM、氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱、奥沙利铂的半数抑制浓度(IC50),并计算耐药指数(RI)。3组实验数据比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t或t检验。结果耐药组的MRP3 mRNA平均含量(5.16±0.31)较对照组(3.08±0.27)和干扰组(2.85±0.23)明显升高(LSD-t=8.765,10.363;P<0.05)。耐药组的MRP3蛋白含量(21 063±274)较对照组(14 476±217)和干扰组(6 660±153)明显升高(LSD-t=21.836,79.578;P<0.05)。耐药组对ADM、5-FU、长春新碱、奥沙利铂的RI分别为14.40±0.31、26.68±0.22、28.70±0.49、20.23±0.54,干扰组相应为3.55±0.16、9.60±0.27、2.11±0.17、3.15±0.13,干扰组的RI明显低于耐药组(t=53.873,84.933,88.811,53.258;P<0.05)。结论 siRNA沉默肝癌细胞MRP3基因可提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性,逆转肝癌细胞对化疗药物的耐药性。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院; 中山大学