摘要
探讨一种可靠、纯度高的犬骨髓间充质干细胞(BMMSCs)体外提取分离、纯化、培养和鉴定的方法。采用骨髓穿刺、Percoll密度梯度离心法分离出犬骨髓单个核细胞,结合贴壁培养法获得纯度高的犬BMMSCs,应用细胞免疫化学和流式细胞仪对犬BMMSCs表面标记蛋白进行细胞鉴定和周期测定。结果显示分离的细胞CD29、CD44均呈阳性表达,CD31、CD34、CD45和vWF的表达为阴性;88.88%的细胞处在G0/G1期;由此证明所分离的细胞为犬BMMSCs,2周内经3代培养即可扩增到107细胞数量级,纯度可达到99%以上,为干细胞移植治疗缺血性心脏病提供充足的细胞来源。
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