G17-白喉毒素嵌合蛋白的表达、纯化和免疫原性初步研究

作者：吴丽娜; 陆瑾; 祝婧烨; 徐帆洪; 瞿爱东^*

来源：国际生物制品学杂志, 2018, 41(06).

• 胃泌素类
• 白喉毒素
• 基因表达
• 免疫,体液

目的构建胃泌素多肽G17-白喉毒素A亚单位(diphtheria toxin subunit A,DTA)嵌合蛋白,并初步研究其免疫原性。方法用酶切法将编码G17的基因与DTA基因连接后,插入载体pET11C,并在大肠埃希菌BL21中表达。先后用阴离子交换色谱法和分子排阻色谱法对表达的目的蛋白进行纯化。用纯化的G17-DTA免疫NIH小鼠,并用ELISA检测小鼠抗G17抗体。结果构建的G17-DTA嵌合蛋白可在大肠埃希菌中高效表达,表达量达0. 5～0. 6 mg/ml菌液。经2次纯化后,G17-DTA的纯度可达95%。纯化的G17-DTA在小鼠中诱生了抗G17抗体。结论构建的G17-DTA嵌合蛋白能在大肠埃希菌中表达,而且在小鼠中具有免疫原性。

• 单位
  上海生物制品研究所有限责任公司