摘要
目的:研究益气解毒方对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小管上皮细胞线粒体自噬作用机制。方法:采用DN大鼠模型,观察益气解毒方对DN的治疗作用。采用苏木素伊红(HE)染色法观察给药后DN大鼠肾脏病理变化,透射电镜观察DN大鼠肾小管上皮细胞线粒体自噬体情况。采用蛋白免疫印迹法检测肾组织中微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(microtubule-associatedprotein1lightchain 3Ⅱ,MAP1LC3-Ⅱ,LC3-Ⅱ),自噬标志物p62蛋白(sequestosome-1,p62),促凋亡蛋白Nix(Bcl-2/E1B 19 k Da-interacting protein 3-like,Nix)的表达,并应用实时荧光定量PCR测定Nix mRNA的表达。结果:与模型组比较,益气解毒方能够增加DN大鼠体重,改善DN大鼠血尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),血糖(GLU),甘油三酯(TG)及总胆固醇(CHOL),白蛋白(Alb)等血、尿生化指标(P<0.01),并且能抑制由DN导致的肾小管上皮细胞线粒体过度自噬,显著降低LC3-Ⅱ,p62,Nix蛋白的表达(P<0.01),同时降低Nix mRNA的表达(P<0.01)。结论:益气解毒方对DN有较好的治疗效果,这可能与其调节DN肾小管上皮细胞线粒体自噬紊乱有关。
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单位南京中医药大学; 连云港市第二人民医院; 国家中医药管理局