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摘要
为探究NtMYB4a是否与其他蛋白质发生互作，并共同影响烟草次生代谢产物的合成和响应非生物胁迫，通过构建NtMYB4a基因酵母双杂交诱饵载体，从烟草cDNA文库中筛选出与NtMYB4a互作的候选蛋白，并利用实时荧光定量PCR初步验证低温胁迫下候选蛋白和NtMYB4a的共表达关系。结果表明，从cDNA文库中初步筛选出39个与NtMYB4a互作的蛋白，经回交验证排除假阳性，最终得到6个与NtMYB4a具有互作关系的蛋白，分别是RALF-like 22蛋白、锌指A20/AN1结构域蛋白、液泡分选蛋白、天冬氨酸蛋白酶、B2蛋白和应激增强蛋白。在低温胁迫下，6种互作蛋白的基因表达量变化趋势与NtMYB4a相似，均呈升高—降低—升高的趋势。相关性分析发现，液泡分选蛋白、B2蛋白、RALF-like 22蛋白和应激增强蛋白基因的表达与NtMYB4a的表达呈正相关关系，锌指A20/AN1结构域蛋白和天冬氨酸蛋白酶基因的表达与NtMYB4a的表达呈较弱的负相关关系，推测NtMYB4a可能与这些蛋白互作参与烟草低温胁迫的防御调控。本研究结果为进一步探究NtMYB4a参与响应非生物胁迫的分子调控机制提供了依据。
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