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摘要
为了探究斑地锦(Euphorbia maculata) CHS2基因表达模式与槲皮素累积量的相关性，本研究综合运用转录组测序、RACE和Tail-PCR技术克隆了斑地锦CHS2基因，将其命名为EmCHS2 (GenBank登录号为OP751804)。生物信息学分析结果显示，EmCHS2开放阅读框(ORF)全长为1 194 bp，编码397个氨基酸，相对分子质量为43.09 kD，理论等电点为5.63，为结构稳定的亲水性非分泌蛋白，不含跨膜区域，定位于细胞质，二级结构以α-螺旋和无规卷曲结构为主，与其他植物CHS基因相似性较高。RT-qPCR结果显示，EmCHS2在斑地锦各组织中表达水平存在差异，且随着斑地锦的成熟，相同组织EmCHS2基因表达水平呈下调趋势。HPLC结果显示，随着斑地锦的成熟，相同组织槲皮素累积量呈下降趋势。结果表明不同生长期相同组织EmCHS2基因表达水平与槲皮素累积量呈正相关，推测EmCHS2基因可能是斑地锦槲皮素生物合成途径中主效基因之一。进一步分析启动子序列显示，EmCHS2表达水平可能受光照、激素(赤霉素，茉莉酸甲酯)等因素的影响，这有望为后续的表达调控研究提供重要线索。本研究不仅丰富了斑地锦的CHS基因资源，也为深入研究CHS2基因功能、表达调控机制以及培育高槲皮素含量斑地锦品种提供了基础。
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