摘要
目的研究不同给药时段对丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinone ⅡA sulfonate,STS)内皮保护作用的影响。方法将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)分组刺激,分为5组:DMEM组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理组、STS预处理+LPS组、STS+LPS共处理组、STS后处理+LPS组。其中,LPS终浓度为1μg·mL-1,STS终浓度为25μg·mL-1,LPS刺激时间为12 h。处理完成后,CCK-8法测定HUVEC活力;ELISA检测细胞培养上清中炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的蛋白浓度;Westernblotting检测细胞裂解液中核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)的蛋白水平;划痕试验检测HUVEC的迁移能力;光镜观察细胞凋亡状态,并用Western blotting检测凋亡相关分子cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白水平。结果与DMEM组相比,LPS处理后HUVEC增殖活力减低;IL-1β和NF-κB蛋白水平增高;细胞迁移能力降低、细胞凋亡增加并伴有cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白水平的升高(P<0.05);STS处理能够部分逆转LPS引起的上述现象,其中以STS预处理的效果最为明显,而STS后处理的效果相对较弱。结论 STS预处理、共处理和后处理均能部分抑制LPS诱导的HUVEC功能异常和凋亡,且以预处理时的效果最为明显。
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单位江苏大学附属医院; 镇江市第一人民医院