血浆蚓激酶定量检测方法的建立及评价

作者：王园园; 付文亮; 王旻; 邹民吉; 徐涛; 王嘉玺; 张菡; 徐东刚

来源：中国实验血液学杂志, 2012, 20(06): 1492-1495.

• 蚓激酶
• 双抗夹心ELISA
• 方法学验证

本研究目的建立血浆蚓激酶的定量检测方法,并利用该方法分析人血浆样本中的蚓激酶含量。利用蚓激酶免疫家兔和BALB/c小鼠,制备其兔源及鼠源的多克隆抗体,建立双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定蚓激酶的方法,绘制蚓激酶含量检测标准曲线,进一步对该方法的特异性、精密度、回收率等进行了分析。利用建立的双抗夹心ELISA检测方法对人血浆中的蚓激酶进行检测,并对检测结果进行评价。结果表明,本研究建立的双抗夹心ELISA检测蚓激酶的标准曲线拟合R值>0.99;精密度评价3个批次内及批间测定值的变异系数(CV)均<15%;回收率评价3个批次内及批间测定值回收率均>80%;定量下限为5 ng/ml(精密度CV<15%,回收率>85%)。结论:本研究建立的双抗夹心ELISA检测方法符合药典所规定的标准,满足药代动力学评价的基本要求,可为蚓激酶的临床试验研究提供可靠的检测方法。

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所; 北京大学人民医院