摘要
目的 探讨白喉毒素A链(DTA)基因在DF3/MUC1启动子调控下的杀伤作用.方法 构建含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A链基因的表达载体pGL3-DF3-DTA,转染DF3阳性的乳癌细胞MCF-7,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DTA基因的表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长活性;免疫组织化学法和流式细胞术检测细胞凋亡.结果 酶切和测序表明获得了与预期结果相一致的pGL3-DF3-DTA真核表达载体.转染MCF-7细胞后,RT-PCR检测到了249 bp的DTA mRNA片段.与对照组比较,转染pGL3-DF3-DTA的MCF-7细胞生长受到了抑制,流式细胞术检测到的凋亡率达39.43%,而对照组仅有0.28%.结论 pGL3-DF3-DTA可对DF3阳性的乳癌细胞产生特异性的杀伤,对乳腺癌的基因治疗有潜在的应用价值.
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单位华中科技大学同济医学院附属协和医院