科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的 探讨杨梅素在SH-SY5Y细胞对抗Aβ寡聚体诱导的突触损伤、线粒体功能障碍和氧化应激中的保护作用及机制。方法 CCK-8检测细胞活性，施加杨梅素5,10和20μmol·L-1预处理SH-SY5Y细胞24 h之后，Aβ1-42寡聚体10μmol·L-1孵育48 h，并设立对照组。分别采用Western印迹法检测各处理组细胞突触前蛋白(SNAP25和snaptophysin)和突触后蛋白(PSD95)；磷酸化tau蛋白(p-tau)和总tau蛋白(t-tau);p-ERK和t-ERK、p-GSK-3β和t-GSK-3β蛋白；线粒体分裂蛋白(动力相关蛋白1,Drp1)和融合蛋白[丝裂蛋白1(Mfn1)和Mfn2]。流式细胞术检测线粒体膜电位变化和活性氧产生，免疫荧光法检测氧化应激标志物8-OHdG和4-HNE变化。结果 (1) Aβ1-42寡聚体处理组与杨梅素预处理组对比，其p-tau/t-tau(Taus396/Tau5)的相对表达量增加了43%(P=0.0328)。(2) Aβ1-42的施加降低了突触前蛋白SNAP25(32%)、突触素snaptophysin(23%)和突触后蛋白PSD95(17%)的相对表达量(P=0.0146)。杨梅素预处理可逆转上述指标变化。(3)杨梅素可抑制SH-SY5Y细胞中Aβ1-42寡聚体诱导的ERK1/2和GSK-3β通路磷酸化(P=0.0002,P=0.0253)。(4)杨梅素可恢复SH-SY5Y细胞中Aβ1-42诱导的线粒体融合蛋白和线粒体膜电位降低以及线粒体分裂蛋白DRP1的磷酸化(P<0.05)。(5)杨梅素阻断了Aβ1-42寡聚体诱导的SH-SY5Y细胞中ROS产生和DNA损伤(P<0.01)。结论杨梅素可抑制Aβ1-42寡聚体诱导的tau蛋白过度磷酸化、突触前和突触后蛋白的损伤、线粒体功能障碍及氧化应激反应，并且上述保护作用经GSK-3β和ERK1/2信号通路介导。
- 单位
