蛋白酶体β亚基4型对人肝癌SMMC7721细胞增殖存活的影响

作者：陆谦; 程欣; 夏振国; 陈钟^*

来源：临床肝胆病杂志, 2020, 36(03): 592-595.

• 癌,肝细胞
• 蛋白酶体β亚基4型
• 细胞增殖
• 细胞存活

目的旨在探讨蛋白酶体β亚基4型(PSMB4)对人肝癌SMMC7721细胞增殖存活的影响及其可能的机制。方法利用特异性短发夹RNA(shRNA)技术构建干扰PSMB4表达的SMMC7721实验组细胞;运用MTT、克隆形成实验检测细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western Blot检测相关蛋白的表达变化。计量资料两组间比较采用独立样本t检验。结果成功构建了干扰PSMB4表达的SMMC7721实验组细胞(shRNA1:t=22. 67,P <0. 000 1; shRNA2; t=30. 88,P <0. 000 1; shRNA3:t=67. 82,P <0. 000 1)。MTT实验显示第4天(0. 477 0±0. 013 5 vs 0. 323 7±0. 012 7,t=8. 286,P=0. 001 2)、第5天(0. 589 3±0. 008 8 vs 0. 384 7±0. 009 0,t=16. 220,P <0. 000 1)实验组细胞OD490值显著低于对照组。克隆形成实验显示细胞集落数显著减少。流式细胞术显示实验组细胞的早期凋亡率[(5. 557 0±0. 258 9)%vs (3. 887 0±0. 332 4)%,t=3. 964,P=0. 016 6]、晚期凋亡率[(12. 630 0±0. 419 8)%vs (5. 310 0±0. 306 2)%,t=14. 080,P=0. 000 1]及总凋亡率[(18. 180 0±0. 678 5)%vs (9. 197 0±0. 631 3)%,t=9. 967,P=0. 000 6]均明显高于对照组,且干扰PSMB4表达的实验组细胞中核因子-κB亚基p65蛋白表达降低(0. 801 5±0. 012 0 vs 0. 284 1±0. 011 0,t=31. 830,P <0. 000 1),核因子-κB抑制蛋白α表达增加(0. 481 6±0. 011 2 vs 0. 658 3±0. 014 2,t=9. 774,P=0. 000 6)。结论干扰PSMB4表达可能通过抑制NF-κB信号通路,从而导致肝癌SMMC7721细胞的增殖存活能力下降。

• 单位
  南通大学附属医院; 南通市通州区人民医院