筛选丙型肝炎病毒非结构蛋白4B转染细胞差异表达基因

作者：刘妍王建军成军杨倩纪冬王春花党小艳徐志强

来源：世界华人消化杂志, 2004, (10): 54-58.

• 基因表达谱
• 转染细胞
• 真核表达载体
• 丙型肝炎病毒
• 非结构蛋白
• 可变区
• 聚合酶链反应
• 载体转染
• 编码基因
• 差异表达

目的:筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)转染细胞差异表达基因,进一步阐明NS4B蛋白在丙型肝炎慢性化及致细胞发生发展过程中的分子生物学机制方法:根据HCV-H病毒株序列设计、合成HCVNS4B基因序列特异性的引物,以含有HV-H全基因组cDNA的质粒pBRTM3011作为模板,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS4B蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术将获得的HCVNS4B编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS4B.以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系.HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体:pcD...

• 单位
  解放军第302医院