摘要
目的 探讨circRNA_0008259调控瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)I型胶原蛋白表达的机制。方法 采用慢病毒过表达circRNA_0008259,分别应用高通量测序及蛋白质组学研究过表达circRNA_0008259后KFs中miRNAs和蛋白质的变化。通过生物信息学以及qRT-PCR分析验证circRNA_0008259下游的耙miRNA和蛋白。应用双荧光素酶报告基因检测法(DLR)验证circRNA_0008259与下游耙miRNA的结合。结果过表达circRNA_0008259后差异表达显著的miRNAs有48种(倍数≥2,P<0.05),差异表达的蛋白有40种(倍数≥1.3,P<0.05)。qRT-PCR证实miR-423-5p水平显著下调,DLR证实miR-423-5p可与circRNA_0008259及耙基因CTSD结合。结论circRNA_0008259可能通过抑制miR-423-5p,进而上调CTSD表达水平,最终抑制KFs中I型胶原蛋白的表达。
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