双氢青蒿素激活LNCaP细胞氯通道并抑制细胞增殖

作者：雷炜; 陈业辉^*; 朱林燕; 侯秀颖; 堐益垚; 张进祥; 翟启良; 查泽玉; 袁红; 卓扬佳; 韩兆冬; 杨海峰

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(10): 1877-1879.

• 前列腺癌
• 双氢青蒿素
• 氯离子通道

目的探讨双氢青蒿素(DHA)通过氯离子通道抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖的作用及其机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测DHA抑制LNCaP细胞增殖, 并确定其半抑制浓度(IC50值):分别配制的浓度梯度为0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000、80.000、160.000 μmol/L DHA溶液, 并按实验设计加入含有LNCaP细胞的96孔板中, 在酶联免疫检测仪490 nm处测量各孔的吸光度(A)值;全细胞膜片钳:检测DHA激活LNCaP细胞氯电流以及氯通道抑制剂4, 4’-二异硫氰酸基-2, 2’-二苯乙烯磺酸二钠(DIDS)和5-硝基-2-(3-苯丙胺)苯甲酸(NPPB)抑制LNCaP细胞氯离子电流。依次用0、±40 mV、±80 mV电脉冲刺激细胞, 每个刺激间隔时间为200 ms, 每个周期间隔为4 s。开始刺激后的10 ms收集和测量电流。通过将电流归一化到膜电容来确定电流密度。组间比较使用独立样本t检验。结果 DHA能够抑制LNCaP细胞增殖, 其抑制效果具有时间依赖性, DHA抑制LNCaP细胞增殖的IC50值随时间延长逐渐降低。在用DHA处理LNCaP细胞24、48、72 h后, 其IC50值分别为(51.34±1.49)、(24.98±2.07)、(22.79±1.38) μmol/L[n=3, t=17.901(24 h比48 h), t=24.349(24 h比72 h), P<0.01]。此外, DHA也能激活LNCaP细胞氯通道产生氯电流, 在80 mV电压钳制下, LNCaP细胞的电流密度增加至(48.30±7.52) pA/pF, 被激活的电流可被氯通道抑制剂抑制至(6.35±2.47) pA/pF(DIDS)和(9.25±2.09) pA/pF(NPPB)[n=3, t=9.180(DHA比DIDS), t=8.666(DHA比NPPB), P<0.01]。结论 DHA能够抑制前列腺癌LNCaP细胞增殖, 其抑制效果具有时间依赖性;DHA也能够激活LNCaP细胞氯离子通道产生氯离子电流, 且激活的氯电流能够被氯通道抑制剂所抑制。

• 单位
  基础医学院; 广州市第一人民医院; 暨南大学; 广东省中医院; 华南理工大学