人LIGHT胞外段基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

作者：郝文丽; 江文正; 闻洁君; 樊燕; 钱旻

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2009, 25(12): 1076-1078.

• LIGHT
• 基因克隆
• 原核表达
• 大肠杆菌 LIGHT
• gene cloning
• prokaryotic expression
• E.coli

目的:构建人LIGHT胞外段基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达。方法:从人外周血单核细胞来源的未成熟树突状细胞中提取总RNA,通过RT-PCR得到LIGHT胞外段基因,并将其克隆至pET32a(+)原核表达载体中,经双酶切鉴定及序列测定后的重组质粒转化入E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行检测。结果:RT-PCR扩增出了大小为543bp的LIGHT胞外段基因,经测序证明序列正确。SDS-PAGE和Western blot分析证实重组质粒可表达出Mr约为41000的蛋白。结论:成功地克隆了人LIGHT胞外段基因并在大肠杆菌...

• 单位
  生命科学学院; 华东师范大学