Dll4基因靶向RNAi重组腺相关病毒载体的构建和高滴度病毒制备

作者：吕伟; 陈凛; 卫勃; 赵云山; 李涛; 彭正; 唐云; 李荣

来源：军医进修学院学报, 2009, 30(03): 354-356.

• Delta-likeligand4(Dll4)
• RNA干扰
• 重组腺相关病毒 delta-like ligand 4(Dll4)
• RNA interference
• recombinant adeno-associated virus(rAAV)

目的:构建一个表达肿瘤血管生成调节基因Delta-like ligand4(Dll4)小干扰RNA的重组腺相关病毒载体,制备靶向性抑制Dll4表达的高滴度重组腺相关病毒。方法:将包含肿瘤血管生成调节基因Dll4特异性小干扰RNA片段的质粒用EcoRI+SalI双酶切,回收目的片段,将pSNAV2.0质粒用EcoRI+SalI双酶切后同目的片段连接,脂质体法转染BHK-2l细胞,G418筛选后以辅助病毒感染获取病毒。结果:PCR和测序证实,成功构建包含U6启动子和肿瘤血管生成调节基因Dll4特异性RNA干扰片段的重组腺相关病毒载体,并制备出滴度为2.4×l011vectorgenome/L高滴度...

• 单位
  解放军总医院