原癌基因c-met mRNA实时荧光定量PCR参考标准的构建

作者：岑东; 吕建新; 裴仁治

来源：临床检验杂志, 2005, (2): 101-103.

DOI：10.3969/j.issn.1001-764X.2005.02.007

• 原癌基因c-met
• mRNA
• 实时荧光定量PCR
• 参考标准

目的构建实时荧光定量PCR(FQ-PCR)标准以定量检测原癌基因c-met mRNA的表达.方法以Trizol裂解抽提法提取新鲜肝组织总RNA.以RT-PCR法制备c-met cDNA目的片段并进行扩增;以A-T载体克隆法将纯化的目的片段与pGEM-T Easy Vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α.采用碱裂解法提取重组质粒,联合用直接PCR、α互补法和氨苄青霉素筛选法、

• 单位
  公共卫生学院; 温州医学院