摘要
目的建立采用高效液相色谱(HPLC)进行大鼠血浆中柴胡注射液有效成分柴胡皂苷d浓度测定的方法。方法取SD雄性大鼠6只,腹腔注射柴胡注射液5 mL/kg,并在不同时间点尾静脉取血,以乙酸乙酯沉淀蛋白法处理血样,并采用HPLC法测定柴胡皂苷d的血药浓度。色谱柱为SWELL Chromplus C18(250 mm×4 mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),紫外检测波长为204 nm,柱温:30℃,流速1 mL/min。结果大鼠血浆中柴胡皂苷d的线性范围为0.1~2 mg/mL(r=0.9955);低、中、高3个浓度准确度回收率分别为92.95%、105.52%、97.86%,日内及日间精密度RSD值均<6%,检测限为2μg/mL。低、中、高3个浓度血浆样品在室温放置12 h、-20℃冰箱冷冻保存10 d,反复冻融3次等情况下的稳定性均较好。结论该方法准确度高,重现性好,适用于柴胡皂苷d血药浓度的测定。
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