蒙药古古勒-4味汤对原代肝细胞氧化应激损伤的保护作用及机制

作者：图门吉日嘎勒; 魏成喜; 霍万学; 张冬丽; 包琳; 翟景波; 王迪; 刘兰英; 刘鑫; 周培清; 樊志菲

来源：内蒙古民族大学学报(自然科学版), 2019, 34(04): 360-364.

DOI：10.14045/j.cnki.15-1220.2019.04.017

• 古古勒-4味汤
• Keap1-Nrf2/ARE信号通路
• 氧化应激

目的:研究古古勒-4味汤(黑云香四味汤散)对H2O2所致的原代肝细胞氧化应激损伤的保护作用及其作用机制.方法:取新生乳鼠肝脏,加入0.1%Ⅱ型胶原酶以及0.1%胰蛋白酶混合液分离培养原代肝细胞,加入不同剂量(100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L) H2O2建立原代肝细胞氧化应激损伤模型.原代肝细胞氧化应激损伤模型建立成功后,加入0.5 mg/mL、1 mg/mL及1.5 mg/mL古古勒-4味汤确定古古勒-4味汤最佳剂量.MTT检测H2O2和古古勒-4味汤最佳剂量及肝细胞活性;收集细胞,采用ELISA检测不同组细胞中GSHPx和SOD的表达情况;采用real-time PCR法检测各组肝细胞Nrf2、Keap1的mRNA表达情况.结果:对数生长期的原代肝细胞加入终浓度为200μmol/L H2O2培养6个小时后,给予1mg/mL古古勒-4味汤处理肝细胞后,肝细胞活力较模型组明显上升;古古勒-4味汤处理后,细胞中SOD、GSH-Px活性增强;古古勒-4味汤处理后,肝细胞活性氧明显降低;古古勒-4味汤处理后,肝细胞Nrf2、Keap1的mRNA水平下调.结论:古古勒-4味汤通过影响Keap1-Nrf2/ARE信号通路,保护由H2O2所致的原代肝细胞氧化应激损伤.

• 单位
  内蒙古民族大学