摘要
目的:研究虎杖苷通过SPOCK2表达对新生小鼠高氧肺损伤的保护作用。方法:体外培养小鼠正常肺上皮细胞mlE-12,作为对照组;利用高氧刺激mlE-12细胞,作为高氧组。用50、100和150μmol/ml的虎杖苷处理mlE-12细胞,再用高氧刺激,作为高氧+低剂量组、高氧+中剂量组和高氧+高剂量组。将pcDNA、pcDNA-SPOCK2转染至mlE-12细胞,再用高氧刺激细胞,作为高氧+pcDNA组、高氧+pcDNA-SPOCK2组。将si-NC、si-SPOCK2转染至mlE-12细胞,高氧刺激后,再用高剂量(150μmol/ml)虎杖苷处理细胞,作为高氧+高剂量+si-NC组、高氧+高剂量+si-SPOCK2组。采用化学法检测细胞丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用酶联免疫吸附试验法检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)的含量。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞SPOCK2 mRNA表达。采用蛋白质印迹法检测SPOCK2蛋白质表达。结果:与对照组比较,高氧组细胞MDA含量显著升高,SOD活性显著降低;与高氧组比较,高氧+低剂量组、高氧+中剂量组和高氧+高剂量组细胞MDA含量显著降低,SOD活性显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,高氧组细胞TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高;与高氧组比较,高氧+低剂量组、高氧+中剂量组和高氧+高剂量组细胞TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,高氧组细胞SPOCK2 mRNA和蛋白表达显著降低;与高氧组比较,高氧+低剂量组、高氧+中剂量组和高氧+高剂量组细胞SPOCK2 mRNA和蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与高氧+pcDNA组比较,高氧+pcDNA-SPOCK2细胞MDA含量和TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低,SOD活性显著升高;与高氧+高剂量+si-NC组比较,高氧+高剂量+si-SPOCK2组细胞MDA含量和TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高,SOD活性显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:虎杖苷通过上调SPOCK2表达抑制新生小鼠高氧肺损伤,对肺部具有保护作用。
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单位电子科技大学; 绵阳市中心医院