胱天蛋白酶3介导BAG3蛋白剪切的研究

作者：张海燕; 都镇先; 孟欣; 邓娓娓; 王华芹

来源：中国医科大学学报, 2012, 41(07): 603-606.

DOI：10.3969/j.issn.0258-4646.2012.07.008

• 胱天蛋白酶
• BAG3
• 裂解
• 凋亡 caspase
• BAG3
• cleavage
• apoptosis

目的解析胱天蛋白酶(caspase)3介导BCL2结合抗凋亡基因3(BAG3)酶切的具体作用靶点,明确caspase 3裂解对BAG3抗凋亡作用的影响。方法采用生物信息学方法筛选BAG3蛋白序列中潜在caspase酶切位点;采用定点突变法构建潜在caspase酶切位点突变体;体外翻译野生型和突变型BAG3蛋白;利用重组caspase对野生型或突变型重组BAG3蛋白进行体外剪切实验;构建BAG3裂解片段的真核表达载体,突变型或片段BAG3表达载体转染SW1990细胞;利用Western blot检测各组细胞中BAG3蛋白的裂解情况;利用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果在BAG3蛋白序列中存在K34...

• 单位
  中国医科大学附属第一医院; 中国医科大学; 基础医学院