miR-21-5p靶向调控Spry1影响人乳腺癌细胞ERK的磷酸化

作者：孙方正; 檀军; 陆祥^*; 陈伟^*

来源：遵义医科大学学报, 2021, 44(01): 21-27.

DOI：10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2021.0005

• 乳腺癌
• miR-21-5p
• Spry1
• ERK磷酸化

目的探讨miR-21-5p在人乳腺癌细胞中调控靶基因影响ERK磷酸化的分子机制。方法利用生物信息学预测miR-21-5p潜在靶基因,双荧光素酶报告实验证实miR-21-5p与预测基因之间的靶向关系;分别转染miR-21-5p mimic和inhibitor及相应阴性对照后,通过RT-qPCR和Western blot检测目的基因的表达。结果 Targetscan-human 7.1数据库显示Spry1是miR-21-5p潜在的靶基因;双荧光素酶报告实验显示,与阴性对照组相比,miR-21-5p mimic和psiCHECK2-Spry1-WT共转组荧光素酶强度明显降低(P<0.001)。MCF-7细胞中过表达miR-21-5p,Spry1 mRNA表达无明显变化(P>0.05),Spry1蛋白表达降低(P<0.05),ERK磷酸化水平升高(P<0.05);抑制miR-21-5p表达,Spry1 mRNA表达无明显变化(P>0.05),Spry1蛋白表达升高(P<0.05),ERK磷酸化水平降低(P<0.05)。过表达Spry1后,ERK磷酸化水平降低(P<0.05);干扰Spry1表达,ERK磷酸化水平升高(P<0.05)。结论在人乳腺癌细胞中Spry1是miR-21-5p的靶基因,在转录后水平或翻译水平miR-21-5p可以抑制Spry1的表达,促进ERK的磷酸化。

• 单位
  遵义医科大学