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摘要
采用λ-Red重组技术对氯嘧磺隆降解菌——吉林克雷伯氏菌2N3的2个水解酶mhpC基因Kj-mhpC-2096和Kj-mhpC-2289分别进行了敲除,获得了2个基因的突变体,并通过PCR对敲除突变体进行了验证。在含有5 mg/L氯嘧磺隆的液体基础培养基中,对突变体的生长速度以及对氯嘧磺隆的降解能力进行了检测。结果表明:10 h内野生型和突变体均生长至最高浓度,ΔKj-mhpC-2096生长速度最慢,最终细胞浓度最低,野生型生长速度最快。8 h内,ΔKj-mhpC-2096和ΔKj-mhpC-2289对氯嘧磺隆的降解率明显低于野生型,在8 h之后ΔKj-mhpC-2289对氯嘧磺隆的降解率逐渐与野生型相当,最终降解率>90%,而ΔKj-mhpC-2096在将氯嘧磺隆降解至约1 mg/L后,基本停止了降解。这表明mhpC的缺失对氯嘧磺隆的降解产生了一定的影响,导致菌株对氯嘧磺隆耐受能力降低,降解率与降解速度均降低,初步证明Kj-mhpC-2096参与了氯嘧磺隆的降解。
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