实时定量RT-PCR监测慢性粒细胞白血病患者造血干细胞移植后bcr-abl mRNA水平

作者：秦亚溱; 李金兰; 主鸿鹄; 阮国瑞; 李玲娣; 张艳; 许兰平; 刘代红; 黄晓军; 陈珊珊; 陆道培; 刘艳荣

来源：中华血液学杂志, 2006, 27(08): 511-514.

DOI：10.3760/j:issn:0253-2727.2006.08.003

• 白血病,髓样,慢性
• 造血干细胞移植
• 融合蛋白类,ber-abl
• 聚合酶链反应

目的评价实时定量 RT-PCR(Q-PCR)技术用于监测慢性粒细胞白血病(CML)患者异基因造血干细胞移植(HSCT)疗效的意义。方法采用基于 TaqMan 探针的 Q-PCR 技术检测112例CML 患者 HSCT 后不同时间共316份骨髓标本 bcr-abl mRNA 的表达。bcr-abl mRNA 水平以内参基因abl 进行归一化。采用荧光原位杂交法(FISH)评估 HSCT 后是否达细胞遗传学完全缓解(CCyR)。结果 Q-PCR 实验可重复敏感度为5个拷贝。abl 及 bcr-abl 基因C_T 值的批内差及批间差均<2.0%。HSCT 后1个月开始持续处于 CCyR 状态的101例患者,中位跟踪时间为12(6～60)个月的289份标本表现为 HSCT 后各时间段均有一定数量患者可检测出 bcr-abl mRNA,总体上随着 HSCT 时间延长,中位水平逐渐降低。HSCT 后1个月中位 bcr-abl 水平为0.035%(0～0.406%),较本室资料初治 CML 慢性期患者中位水平降低3个对数级,3个月时为0.006%(0～0.683%),6个月开始降至0%(0～0.225%),移植6个月后标本最高 bcr-abl 水平为0.068%。8例患者 HSCT 后未达 CCyR 或遗传学复发时 bcr-abl 水平为0.12%～13.45%,其中5例患者遗传学复发前的1份标本(复发前1～2个月) bcr-abl 水平为0.09%～3.42%。9例持续 CCyR 患者 bcr-abl 水平曾经>0.090%,但随后均下降至0。2例急变期患者 HSCT 后1.6和3个月内持续 CCyR,但分别于1个月和1.5个月后进展为血液学复发,bcr-abl 水平亦从0及0.140% 分别急剧增至46.900% 和75.900%。结论 Q-PCR 技术精确、可靠,对CML 患者 HSCT 后有必要定期系列监测 bcr-abl 水平,以及时了解病情变化。对急变期患者需要更密切的监测。

• 单位
  北京大学人民医院; 北京大学