猫泛白细胞减少症病毒的分离鉴定及其结构蛋白VP2可溶性表达的调控

作者：刘丽春; 徐国伟; 茹毅; 李亚军; 杨明星; 梁超; 刘晓飞; 张世栋; 李建喜; 王学智; 孙研^*; 周雨霞^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(06): 706-714.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0084

• 猫泛白细胞减少症病毒
• 中华田园猫
• SUMO标签
• 分子伴侣
• 亚单位疫苗

为了研究猫泛白细胞减少症病毒（FPV）的生物学特性，可溶性表达FPV结构蛋白，研发基于VP2的新型亚单位疫苗，采集40份疑似FPV阳性的中华田园猫粪便样本，通过qPCR对样本检测后利用细胞培养、血凝试验、PCR和电镜观察等试验鉴定分离株，并对其VP2基因进行同源性比对。同时，构建pET-28aVP2、pET-28a-SUMO-VP2和pET-22a-SUMO-VP2重组质粒并利用大肠杆菌进行表达。结果显示，成功分离出1株FPV毒株；生物信息学分析表明，该毒株的VP2基因与此前报道的毒株同源性高达99%。蛋白表达结果显示，单独使用SUMO标签对VP2蛋白的可溶性表达影响较低；然而，当带有SUMO标签的重组质粒与4个分子伴侣（p G-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16）分别共表达时，可溶性VP2的表达量可显著提高。该研究可为FPV亚单位疫苗研发提供数据和有效的生物材料。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所; 内蒙古农业大学