摘要

氧化应激介导的鹅(Anser cygnoides)卵泡颗粒细胞(granulosa cells, GCs)凋亡影响鹅产蛋性能。本研究旨在探讨抗氧化剂维生素E(vitamin E, VE)对鹅卵泡GCs凋亡的缓解作用。通过添加H2O2(100μmol/L)建立鹅卵泡GCs氧化应激模型,并在体外检测氧化应激对鹅卵泡GCs凋亡的影响。在该模型中分别添加4种不同浓度的原花青素、白藜芦醇、没食子酸和VE,筛选出最佳缓解剂及最适浓度。进一步采用ELISA、qPCR和免疫荧光检测等技术探讨最佳缓解剂VE对氧化应激介导的鹅卵泡GCs凋亡的作用。结果表明,100μmol/L H2O2处理12 h极显著促进鹅卵泡GCs凋亡(P<0.01);4种不同抗氧化剂中,40μmol/L VE对氧化应激模型的缓解作用最佳(P<0.01),添加后可减少细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)的释放量(P<0.05),降低氧化应激相关基因超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase1, SOD-1)、SOD-2、过氧化氢酶(catalase, CAT)表达量、环氧化酶2(cyclooxygenase, COX-2)和活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量(P<0.05);细胞增殖活力显著上升(P<0.05)且呈剂量依赖性,抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2, Bcl-2)的表达量显著上升(P<0.05),促凋亡基因半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3, Caspase3)、Caspase9和肿瘤抑制基因肿瘤蛋白p53(tumor protein p53, p53)的表达量显著下降(P<0.05),细胞凋亡数显著降低(P<0.05)。本研究表明,在氧化应激诱导条件下,鹅卵泡GCs存在明显的凋亡,添加VE可抑制氧化应激缓解鹅卵泡GCs凋亡,本研究可为提高鹅的产蛋性能提供参考。