β-玉米赤霉烯醇单克隆抗体的研制及CiELISA检测方法的建立

作者：朱根生; 王凤丽; 夏苏干; 原俊朝; 邹辉; 顾建红; 袁燕; 刘学忠; 刘宗平; 卞建春^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(11): 1469-1474.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0175

• β-玉米赤霉烯醇
• 单克隆抗体
• 间接竞争酶联免疫吸附试验
• 回收试验

为建立一种针对β-玉米赤霉烯醇(β-ZOL)快速准确的检测方法,笔者用活性酯法将β-ZOL与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联合成人工完全抗原,纯化鉴定后免疫BALB/c小鼠。经筛选最终获得1株稳定分泌抗β-ZOL抗体的细胞株1F5。利用该抗体建立检测β-ZOL的间接竞争酶联免疫吸附试验(CiELISA)方法。结果显示,β-ZOL的药物抑制标准曲线在浓度为5～500 ng/m L时线性关系良好,标准曲线方程为y=0.406 3x-0.204 2(R2=0.990 4),IC50为53.19 ng/m L,检测下限(LOD)为6 ng/m L。该单克隆抗体对β-ZOL的抑制率为100%,与α-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉烯酮、β-雌二醇、呕吐毒素、伏马毒素等基本无交叉反应。牛奶样品β-ZOL添加回收试验显示,β-ZOL的回收率为91.24%～110.07%,变异系数为6.17%～8.73%。说明建立的检测β-ZOL的CiELISA方法稳定可靠。

• 单位
  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 扬州大学