阿魏酸对LPS诱导的肺微血管内皮细胞凋亡的保护作用及可能机制

作者：张勤芹; 全超; 刘亚军; 朱金凤; 金秋芬; 王智兰^*

来源：国际呼吸杂志, 2022, 42(19).

• 细胞凋亡
• 肺微血管内皮细胞
• 微小RNA-17
• 阿魏酸

目的探讨miR-17在肺微血管内皮细胞(PMVECs)的凋亡中的表达及阿魏酸(FA)对细菌脂多糖(LPS)诱导的PMVECs凋亡的作用及机制。方法本研究为实验研究。用不同剂量(0、0.1、1、10、100 mg/L)的FA刺激PMVECs 24 h, 采用MTT法检测细胞活性, 选择合适的FA浓度进行后续试验。将PMVECs分为对照组、LPS组、FA低剂量组(LPS+0.1 mg/L FA)、FA中剂量组(LPS+1 mg/L FA)、FA高剂量组(LPS+10 mg/L FA), 流式细胞仪分析检测各种细胞凋亡率, 蛋白免疫印迹法检测Caspase-3、Bax蛋白、Bcl-2蛋白, 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-17确定FA对PMVECs凋亡的影响。将PMVECs分为对照组、LPS组、LPS+FA组(LPS+10 mg/L FA)、LPS+FA+inhibitor NC组、LPS+FA+miR-17 inhibitor组, 检测各组细胞的凋亡率及凋亡蛋白、miR-17的表达以确定FA的作用靶点。结果 100 mg/L FA不适合。LPS组较对照组细胞凋亡率、Caspase-3、Bax增加, Bcl-2蛋白、miR-17减少(P值均<0.05), FA低、中、高剂量组细胞较LPS组凋亡率、Caspase-3、Bax减少, Bcl-2蛋白、miR-17增加(P值均<0.05), 且FA高剂量组凋亡率较低FA剂量组减少(P<0.05)。LPS+FA+miR-17 inhibitor组较LPS+FA+inhibitor NC组的miR-17表达低, 且凋亡率、Caspase-3、Bax高, Bcl-2蛋白低(P值均<0.05)。结论 LPS导致的炎性状态能抑制miR-17的表达, 从而导致PMVECs凋亡, 其机制可能与miR-17表达减少从而介导Bax、Caspase-3的表达增加、Bcl-2的表达减少有关, FA可以直接上调miR-17的表达, 减少Bax、Caspase-3, 增加Bcl-2的表达, 最终减少LPS诱发的PMVECs凋亡, 提示一定浓度的FA可能是急性呼吸窘迫综合征治疗的有效药物。

• 单位
  南通市中医院