靶向Trop-2 CAR-T细胞的制备及其体外对卵巢癌细胞杀伤作用的研究

作者：徐亚如; 周荧; 唐奇; 刘振云; 黄骁辰; 杨婷婷; 张慧林; 赵薇; 蒯兴旺; 仇镇宁; 朱进; 冯振卿

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2017, 37(06): 653-658.

DOI：10.7655/NYDXBNS20170601

• 嵌合抗原受体
• Trop-2
• 卵巢癌

目的:制备靶向人滋养层细胞表面抗原2(human trophoblast cell surface antigen 2,Trop-2)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell,CAR-T),观察Trop-2 CAR-T细胞在体外对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:运用分子克隆及基因重组技术构建Trop-2 CAR;采用Western blot检测Trop-2 CAR在293T细胞中的表达;CCK-8法检测Trop-2 CAR-T细胞对卵巢癌细胞增殖的影响;ELISA检测细胞因子分泌的变化。结果:酶切鉴定及测序分析结果表明,Trop-2 CAR各基因片段连接正确;Western blot检测结果显示,该质粒能够在293T细胞中有效表达;CCK-8结果显示,制备的Trop-2 CAR-T细胞在体外能明显抑制表达Trop-2的卵巢癌细胞的增殖(P<0.05);ELISA检测结果表明Trop-2 CAR-T细胞与表达Trop-2的卵巢癌细胞共培养后,干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素(interleukin-2,IL-2)细胞因子分泌增加(P<0.01)。结论:该研究成功制备了Trop-2 CAR-T细胞,可有效抑制Trop-2表达阳性的卵巢癌细胞的增殖。

• 单位
  安徽未名细胞治疗有限公司; 中国人民解放军南京军区军事医学研究所; 南京医科大学; 南京医科大学第二附属医院; 南京医科大学附属南京妇幼保健院