桃红四物汤影响ERK磷酸化表达延缓小鼠胚胎成纤维细胞生长的机理研究

作者：李振万; 马进; 罗月中; 匡忠生; 江湧^*

来源：中药新药与临床药理, 2021, 32(06): 806-814.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2021.06.009

• 桃红四物汤
• 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)
• 细胞外调节蛋白激酶(ERK)
• 小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3,3T3)
• 过表达
• PD98059

目的探讨活血化瘀名方桃红四物汤(THSWD)减缓小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3,3T3)生长和增殖可能的分子靶点及信号通路。方法在3T3细胞内分别过表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、沉默bFGF以及用PD98059阻断细胞内ERK上游信号通路;然后观察桃红四物汤对细胞活性,细胞周期,bFGF、ERK1/2及p-ERK1/2基因或蛋白表达的影响。桃红四物汤含药血清培养基浓度为20%,作用时间48 h。结果与正常对照组比较,桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.01);G0/G1期占比升高(P<0.05,P<0.01),S期占比降低(P<0.05,P<0.01);bFGF和ERK1/2基因表达降低(P<0.01);bFGF和p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。与bFGF过表达组比较,bFGF过表达+桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.05);G0/G1期占比升高(P<0.01),S期占比的差异无统计学意义(P>0.05);bFGF和ERK1/2基因表达降低(P<0.01);bFGF和p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.01),ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。与PD98059组比较,PD98059+桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.05);G0/G1期占比升高(P<0.01),S期占比降低(P<0.01);ERK1/2基因表达的差异无统计学意义(P>0.05);ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。由于bFGF基因的结构独特性及沉默引物设计的方法学缺陷,3T3细胞内未能沉默掉bFGF。结论桃红四物汤在3T3细胞中首先降低bFGF,进而降低ERK信号通路的标志性蛋白p-ERK的表达,减缓3T3细胞的增殖速度。

• 单位
  第一临床医学院; 广州中医药大学