Ang-(1-7)及Mas受体拮抗剂对低氧诱导小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及PKCα/Akt信号分子表达的影响

作者：李杰娜; 王晓亮; 张亚萍; 施熠炜^*

来源：国际呼吸杂志, 2022, 42(07): 519-525.

• 肺动脉高压
• 平滑肌
• 细胞低氧
• 蛋白激酶C
• 蛋白激酶B
• Ang-(1-7)

目的探讨Ang-(1-7)及Mas受体拮抗剂A779对低氧诱导小鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖及PKCα/Akt信号分子在低氧诱导小鼠PASMCs中表达的影响。方法本研究为实验研究。选取C57BL/6J健康成年小鼠, 使用磁性分离法原代培养小鼠PASMCs, 选取第3代细胞进行实验。使用三气培养箱进行低氧处理, 给予Ang-(1-7)及Mas受体拮抗剂A779进行药物干预。实验共分为6组, 即常氧组、常氧+Ang-(1-7)组、低氧组、低氧+Ang-(1-7)组、低氧+Ang-(1-7)+A779组和低氧+A779组。使用CCK-8检测各实验组小鼠PASMCs增殖情况;免疫荧光、蛋白质印迹法检测各实验组PKCα/Akt蛋白分子表达变化情况。结果经免疫荧光染色鉴定原代培养PASMCs纯度约90%。低氧24 h后, 与常氧组比较, 低氧组、常氧+Ang-(1-7)组与低氧+Ang-(1-7)组间细胞增殖能力差异均无统计学意义(P值均>0.05);低氧+Ang-(1-7)+A779组和低氧+A779组细胞增殖能力增强(P值均<0.05)。随着低氧时间延长至48、72 h, 各低氧组细胞增殖能力呈逐渐下降趋势。与常氧组比较, 低氧组、低氧+Ang-(1-7)组、常氧+Ang-(1-7)组的PKCα蛋白表达均降低, 低氧+Ang-(1-7)+A779组和低氧+A779组的PKCα蛋白表达均升高, 差异均有统计学意义(P值均<0.01)。与常氧组比较, 常氧+Ang-(1-7)组、低氧组Akt蛋白分子表达差异无统计学意义(P值均>0.05), 低氧+Ang-(1-7)组、低氧+Ang-(1-7)+A779组和低氧+A779组Akt蛋白表达均升高, 差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论抑制Ang-(1-7)特异性Mas受体可促进低氧环境下小鼠PASMCs增殖, 该过程可能通过提高PKCα、Akt信号分子的表达实现。Ang-(1-7)可抑制该过程中Akt信号分子表达, 但尚未发现对PKCα信号分子表达及细胞增殖的影响。

• 单位
  山西医科大学; 山西医科大学第一医院; 第一临床医学院