双氢青蒿素通过PI3K/Akt通路逆转肺癌顺铂耐药A549/DDP细胞的分子机制

作者：孙卉; 陈晓静; 刘丽; 张真^*

来源：中国药师, 2021, 24(06): 1013-1017.

• 肺癌
• 顺铂耐药
• 双氢青蒿素
• 磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B通路

目的:研究双氢青蒿素通过磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)通路逆转肺癌顺铂耐药A549/DDP细胞的分子机制。方法:体外培养人肺癌耐顺铂株(A549/DDP),给予不同浓度双氢青蒿素(20,40,80,160,200,250,300μmol·L-1)处理48 h后,通过MTT法检测双氢青蒿素对A549/DDP细胞增殖影响,选取双氢青蒿素最佳实验浓度及在不同浓度DDP(0,20,40,60,80,100μmol·L-1)作用下观察并计算顺铂对A549/DDP细胞IC50和双氢青蒿素对A549/DDP逆转倍数;通过流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)及PI3K/Akt通路相关蛋白PI3K、AKT、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达。结果:随双氢青蒿素浓度升高,细胞增殖抑制率依次升高(P<0.05),且具有浓度依赖性,IC10(32.07±1.04)μmol·L-1是双氢青蒿素为最佳逆转耐药浓度;随DDP浓度的升高,双氢青蒿素A549/DDP细胞增殖抑制率随之升高(P<0.05),DDP+双氢青蒿素组顺铂对A549/DDP的IC50为(26.42±1.23)μmol·L-1,顺铂组为(58.16±1.32)μmol·L-1,双氢青蒿素的逆转耐药倍数为2.21;与对照组相比,DDP组、双氢青蒿素组、DDP+双氢青蒿素组细胞凋亡率、caspase-3表达显著升高(P<0.05),Bcl-2、PI3K、p-Akt/Akt表达显著降低(P<0.05);与DDP组、双氢青蒿素组相比,DDP+双氢青蒿素组细胞凋亡率、caspase-3表达显著升高(P<0.05),Bcl-2、PI3K、p-Akt/Akt表达显著降低(P<0.05)。结论:双氢青蒿素通过抑制PI3K/Akt通路促进A549/DDP细胞凋亡,在一定程度上可逆转肺癌A549/DDP细胞株对顺铂的耐药性。