新型冠状病毒核酸荧光型RT-RAA检测方法的建立及其评价

作者：高越; 刘伯玉; 任翠平; 高勇; 朱禹; 杨莉; 温萌; 钱振; 芦宝静; 柳燕^*

来源：安徽医科大学学报, 2021, 56(06): 980-985.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2021.06.029

• SARS-CoV-2
• RT-RAA
• 核酸
• 快速检测

目的建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)荧光型RT-RAA快速检测方法。方法以体外转录SARS-CoV-2的RNA为模板,利用单链DNA结合蛋白、重组酶和DNA聚合酶,在40.5℃恒温下,快速完成orf1ab基因和S基因序列片段的扩增,并用已知新冠核酸阳性和其他呼吸道病毒感染患者咽拭子标本进行初步评价。结果该研究建立的方法分别检测SARS-CoV-2两种基因的所需时长均在20 min以内,检测2种基因的灵敏度均为2拷贝数/反应管,特异性为100%,2种引物的最低检出限3次重复实验扩增反应起峰时间一致,曲线形态接近。结论该研究建立的方法灵敏性高,特异性强,重复性良好,临床标本检测结果符合率高,且不需要昂贵的仪器,适用于现场快速检测。

• 单位
  阜阳市第二人民医院; 基础医学院; 安徽医科大学