畜禽肉及饲料中氟苯尼考残留免疫分析方法研究

作者:谢美婵; 杨金易; 李然; 肖治理; 王弘; 徐振林; 孙远明; 沈玉栋*
来源:分析测试学报, 2021, 40(09): 1380-1385.
DOI:10.19969/j.fxcsxb.20120801

摘要

针对动物源性食品及饲料中氟苯尼考的残留问题,通过抗原制备、动物免疫和细胞融合筛选,成功得到可高特异性识别氟苯尼考的单克隆抗体,并建立了氟苯尼考的间接竞争酶联免疫分析(icELISA)方法。经单因素实验优化策略,确定最佳反应条件为:包被抗原质量浓度0.05μg/mL,抗体质量浓度为0.1μg/mL,最佳药物、抗体和二抗稀释液均为磷酸缓冲液(PBST),抗体稀释液吐温-20含量0.05%,竞争反应时间30 min,二抗质量浓度为0.167μg/mL,二抗反应时间30 min。在该条件下,建立了氟苯尼考的icELISA检测方法,其IC50为9.48 ng/mL,线性检测范围为1.75~51.36 ng/mL,检出限(LOD)达0.64 ng/mL,且与氯霉素等结构及功能类似物均无明显交叉反应,特异性良好。实际样品的加标回收率为88.1%~107%,相对标准偏差(RSD)<15%。将所建立的方法用于畜禽肉及饲料样品的检测,结果与HPLC-MS/MS判定结果一致,说明该方法适用于畜禽产品及饲料中氟苯尼考的残留检测。

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