摘要

目的 探讨迷迭香酸对叉头框转录因子O3a(Forkhead box O3a,FOXO3a)/血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路蛋白表达及对高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(Human retinal microvascular endothelial cells,HRMEC)的保护作用。方法 将HRMEC进行高糖诱导培养,分别通过不同浓度的迷迭香酸进行处理并分组,包括空白组、低糖组、高糖组、低剂量迷迭香酸组(12.5μmol/L)、中剂量迷迭香酸组(25μmol/L)及高剂量迷迭香酸组(50μmol/L)。通过MTT检测各组HRMEC增殖活性水平,通过RT-PCR检测各组HRMEC中VEGF的mRNA相对表达水平,通过流式细胞术检测HRMEC周期分布,通过Western Blot检测各组HRMEC中VEGF、FOXO3a、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期相关蛋白CDK2、Cyclin A1的蛋白相对表达水平。结果 与空白组相比,低糖环境下HRMEC各项指标比较差异无统计学意义(均P>0.05),而在高糖环境下HRMEC增殖活性显著增加,VEGF mRNA水平显著增加,细胞周期处于周期循环状态,且VEGF、FOXO3a、PCNA、CDK2、Cyclin A1各蛋白相对表达水平均明显上升(均P<0.05);与高糖组相比,经不同浓度的迷迭香酸处理后,HRMEC增殖活性显著降低,VEGF与FOXO3a mRNA水平明显降低,阻滞于G0/G1期的细胞比例明显增加,且VEGF、FOXO3a、PCNA、CDK2、Cyclin A1各蛋白相对表达水平均显著受到抑制(均P<0.05),同时其变化水平存在剂量依赖性,其中高剂量迷迭香酸组各指标变化最大。结论 迷迭香酸可能通过阻滞高糖环境下HRMEC周期进程,进而抑制其细胞增殖,发挥保护作用,这一过程可能与调控FOXO3a/VEGF信号通路有关。