牙龈卟啉单胞菌脂多糖诱导THP-1细胞分泌IL-1β、TNF-α、IL-6能力及其相关Toll样受体的差异性

作者：楼小戟; 张迪亚; 严杰; 李盛来; 陈莉丽

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2008, 28(8): 717-721.

DOI：10.3321/j.issn:0254-5101.2008.08.014

• 牙龈卟啉单胞菌
• 脂多糖
• THP-1细胞
• 炎性细胞因子
• Toll样受体

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(LPS)诱导人单核-巨噬样细胞THP-1分泌IL-1β、TNF-α、IL-6能力及相关Toll样受体(TLR)的差异. 方法 采用酚水法提取Pg ATCC33277株脂多糖(Pg-LPS),并用红外光谱法和鲎试验进行鉴定.采用ELISA试剂盒定量检测Pg-LPS作用的THP-1细胞分泌IL-1β、TNF-α和IL-6水平.采用TLR2或TLR4单克隆抗体阻断试验联合ELISA检测,了解Pg-LPS结合靶细胞上Toll样受体的类型.实验中采用大肠杆菌0111:B4株脂多糖(E-LPS)作为对照. 结果 1μg/ml Pg-LPS作用THP-1细胞,分别于0.5、6和6 h检测分泌IL-1β、TNF-α和IL-6的水平明显升高(P<O.01);1 μg/ml E-LPS作用THP-1细胞,分别于6、24和24 h检测分泌IL-1β、TNF-α和IL-6水平亦明显升高(P<0.01).Pg-LPS和E-LPS诱生的上述细胞因子最高浓度相近(P>0.05).TLR2或TLR4单抗均可有效阻断Pg-LPS作用的THP-1细胞分泌IL-1B或IL-6(P<0.05),但仅,ILR2单抗显示了阻断TNF-α分泌的作用(P<0.05).E-LPS诱导THP-1细胞分泌上述3种细胞因子的活性仅可被TLR4单抗所阻断(P<0.05). 结论 Pg-LPS诱导THP-1细胞分泌IL-1β、TNF-α和IL-6活性略高于E-LPS,TLR2而非TLR4是Pg-LPS介导靶细胞分泌上述细胞因子的主要受体.

• 单位
  浙江大学; 浙江大学医学院附属口腔医院; 浙江大学医学院附属第二医院